1. 如果需繼續(xù)使用緩沖液，則建議將 10x 緩沖液保存在 4°C 下 1-2 周。如要保存更長時間，則緩沖液應保存在 -20°C 下。如果要進行數(shù)次實驗，則建議分裝 10x 緩沖液。
2. 在 24-30°C 下解凍 10x 緩沖液，上下顛倒混合。
3. 用 ddH2O 將 10X Cell Lysis Buffer 稀釋為 1X 溶液。該產(chǎn)品提供的 10X 材料足以制備 150ml 總細胞提取物。
4. 將 1X 緩沖液放在冰上冷凍，并在使用前立即添加 PMSF。
注意：CST 建議使用前立即添加 1 mM PMSF。
裂解：
如需裂解黏附細胞，我們建議以下步驟：（所有試劑和裂解物必須冷藏）。
1. 按需處理細胞。
2. 平板用 PBS 洗滌，以去除殘留的培養(yǎng)基。
3. 每個 10 cm 培養(yǎng)皿添加 400 μL 1x 裂解緩沖液。
4. 平板放在冰上孵育 5 分鐘。
5. 刮取細胞。
6. 超聲短暫處理。
7. 提取物用冷卻的微量離心機以 14,000 x g 的離心力旋轉(zhuǎn)分離 10 分鐘。
8. 取上清液后使用。
其他注意事項：
1. 對于非黏附細胞，用 1X PBS 洗滌并進行沉淀后，每 107 個細胞添加 400 μl 緩沖液。
2. 2X #9803 Cell Lysis Buffer 用于裂解組織樣品，但是在添加裂解緩沖液后建議進入均一化步驟。提取組織，比例為
100 mg 組織：1 ml 緩沖液。組織提取物還需進行超聲處理。
3. 其他蛋白酶抑制劑可添加到 1x 裂解緩沖液中。