殺稻瘟菌素 S 是從灰色鏈霉菌中分離出的一種肽基核苷類抗生素。它是細(xì)菌和真核細(xì)胞中蛋白合成的強(qiáng)效抑制劑，同時(shí)在真菌、線蟲和腫瘤細(xì)胞中也具有活性。殺稻瘟菌素 S 通過阻斷釋放因子誘導(dǎo)的肽基-tRNA 水解而起作用，并抑制肽鍵形成。可用作哺乳動(dòng)物細(xì)胞和細(xì)菌細(xì)胞的選擇劑。建議的工作濃度介于 1 至 30 μg/mL 之間，具體取決于細(xì)胞系，用于細(xì)菌選擇的濃度為 25–100 μg/mL。迅速發(fā)生細(xì)胞死亡，可在不到一周內(nèi)生成對(duì)殺稻瘟菌素穩(wěn)定耐藥的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系。

攜帶 BSR 和 BSD（分別從蠟樣芽孢桿菌 K55-S 和土曲霉中分離出）可獲得殺稻瘟菌素 S 抗性。BSR 抗性基因編碼殺稻瘟菌素 S 脫氨酶，該酶催化殺稻瘟菌素 S 轉(zhuǎn)化為脫氨基羥基殺稻瘟菌素 S。脫氨基羥基稻瘟菌素 S 是殺稻瘟菌素 S 的非生物活性衍生物，不與原核或真核核糖體相互作用或抑制二者。BSD 抗性基因也編碼殺稻瘟菌素 S 脫氨酶，該酶催化與 BSR 脫氨酶類似的反應(yīng)。

要進(jìn)行細(xì)菌選擇，LB 培養(yǎng)基的鹽含量必須保持低水平 (<90 mM)，pH 值不應(yīng)超過 7.0，以維持殺稻瘟菌素 S 的活性。建議使用殺菌曲線，以確定殺滅非耐藥性細(xì)胞的殺稻瘟菌素 S 有效濃度下限。

應(yīng)用
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